На посев? Это частый вопрос. Разберемся в данной статье.

Все воспаления мочевого пузыря, почек, уретры на девяносто пять процентов провоцируются инфекционными агентами, главными в числе которых выступают протей, стафилококки и энтеробактерии. Называются они уропатогенной флорой. Для выявления источника заболевания пациента проводится бак. посев мочи больного. Данный метод требует строго соблюдения норм сбора урины, специального оборудования со средами и термостатами, а также компетентных специалистов.

Где проводятся?

• при пиелонефрите - 1000 КОЕ и больше;
• при цистите - 100 КОЕ.

Если показатель КОЕ превышает 100 000, то уже не нужно сомневаться в активности возбудителя. Необходимо срочно начинать лечение, поскольку такая картина бывает при катетерной инфекции.

Бак. посев мочи на чувствительность к антибиотикам

Для определения оптимального способа терапии можно использовать анализ культуры на его чувствительность к различным антибиотикам. Его результат называется также антибиотикограммой.

В чём заключается суть данного исследования? Нужно разделить на части чашку Петри и поместить в каждую полоску или кружок, пропитанные антибиотиком. Маркировка их осуществляется либо с внешней стороны чашки, либо по цвету.

Засевают в сектора. Затем чашку ставят в термостат, имеющий температуру тела человека, и ежедневно контролируют. Если антибиотик идеальный, то он убьёт бактерии, и в секторе не будет роста. В случае же устойчивости возбудителя будет отмечен рост колонии.

Чтобы получить результат, нужно подождать от четырёх до пяти дней. Благодаря новым методам можно выполнить исследование за два дня, при этом будет определена не только чувствительность препаратов, но и их лечебная доза.

Мы выяснили, что показывает анализ мочи на посев.

Известно, что микроорганизмы, невзирая на свой «малый рост», тоже имеют пищевые «пристрастия», температурный оптимум, в общем, среду, которая им идеально подходит, где они чувствуют себя комфортно и хорошо, а поэтому начинают интенсивно размножаться и расти.

Бактериологический посев или, как принято называть короче – бак посев, применяется для получения большого количества микробов одного вида (чистая культура) с целью изучения их физико-химических и биологических свойств, чтобы затем полученные данные использовать для диагностики инфекционных заболеваний.

К сожалению, даже популярные нынче , и другие методы, основным недостатком которых являются ложноположительные или ложноотрицательные результаты, не всегда могут идентифицировать возбудителя. Кроме того, они не способны подобрать антибактериальные препараты направленного действия. Подобную задачу решает бак посев, который часто не спешат назначать, ссылаясь на то, что, например, медленно культивируется, а стоимость анализа немалая. Однако ведь и здоровье того стоит!

Для питания и дыхания нужны условия

Микробиологи нынче знают, что каждому возбудителю нужна своя «родная» среда с учетом ее рН, окислительно-восстановительных потенциалов, вязкости, влажности и осмотических свойств. Среды могут быть мягкими и твердыми, простыми и сложными, универсальными и не очень, однако во всех случаях они должны обеспечивать питание, дыхание, размножение и рост бактериальной клетки.

пример роста микроорганизмов после бак-посева в питательную среду

Некоторые среды (тиогликолевая, Сабуро) подходят для широкого круга микроорганизмов и называются универсальными. Другие же предназначены только для определенных видов, например, пневмококк и золотистый стафилококк, продуцирующие гемолизины, растут на кровяном агаре, который служит для выделения особо «капризных» и, вместе с тем, опасных штаммов. Таким образом, разновидностей сред множество, где каждая из них выращивает свой круг микроорганизмов.

Цель культивирования микроорганизмов и значимость ее для диагностики

Кроме воды, воздуха, почвы, содержащие в тех или иных концентрациях различные микроорганизмы, в том числе и приносящие болезнь (патогенные), многие отрасли медицинской науки интересуют микробы, живущие на коже и слизистых человеческого организма, которые могут быть представлены:

• Постоянными обитателями, не несущими никакой опасности человеку, то есть, нормальной микрофлорой организма, без которой мы просто жить не можем. Например, исчезновение бактерий, живущих в кишечнике и участвующих в процессе пищеварения, приводит к дисбактериозу, лечить который – дело непростое. Так же происходит и с исчезновением вагинальной микрофлоры. Ее тут же заселяют условно-патогенные микроорганизмы, гарднереллы, например, которые вызывают ;
• Условно-патогенной флорой, которая приносит вред лишь в больших количествах при определенных условиях (иммунодефицит). Вышеназванная гарднерелла – представитель такого типа микроорганизмов;
• Наличием патогенных микробов , которые в здоровом теле не присутствуют. Они чужды человеческому организму, куда попадают случайно при контакте с другим (больным) человеком и вызывают развитие инфекционного процесса, порой, довольно тяжелого или даже смертельного. Например, встреча с возбудителями – еще куда ни шло, на первых порах лечится, а вот (упаси Бог!) выпустит на волю холеру, чуму, черную оспу и др.

К счастью, многие из них побеждены и в настоящее время находятся «за семью печатями» в специальных лабораториях, однако человечество в любой момент должно быть готово к нашествию невидимого врага, способного уничтожить целые народы. Бактериологический посев в подобных случаях играет, пожалуй, главную роль в идентификации микроорганизма, то есть, определении рода, вида, типа и т.д. (токсономическое положение), что очень важно для диагностики инфекционных процессов, в том числе и заболеваний, передающихся половым путем.

Таким образом, методы посева, как и питательные среды, бывают разными, тем не менее, цель у них одна: получить чистую культуру без посторонних примесей в виде микробов других классов , которые обитают повсеместно: в воде, в воздухе, на поверхностях, на человеке и внутри его.

Когда назначается бак посев и как разобраться в ответах?

Название микроорганизма и его количество

Бактериологический анализ пациенты сами себе не назначают, это делает врач, если у него есть подозрения, что проблемы больного, предъявляющего различные жалобы, связаны с проникновением в организм патогенного возбудителя или с усиленным размножением микроорганизмов, постоянно живущих с человеком, но проявляющих патогенные свойства только в определенных условиях. Сдав анализ и через некоторое время получив на руки ответ, человек теряется, а порой и пугается, увидев непонятные слова и обозначения, поэтому, чтобы этого не произошло, хочется дать краткое разъяснение по данному вопросу:

При исследовании биологического материала на присутствие патогенных микроорганизмов ответ может быть отрицательным или положительным («плохой бак посев»), поскольку организм человека является для них лишь временным пристанищем, а не естественной средой обитания.

Иной раз, в зависимости от того, какой материал подлежит посеву, можно увидеть количество микроорганизмов, выраженное в колониеобразующих единицах на мл (одна живая клетка даст рост целой колонии) – КОЕ/мл. Например, посев мочи для бактериологического исследования при норме дает до 10 3 КОЕ/мл всех выявленных бактериальных клеток, в сомнительных случаях (анализ повторить!) – 10 3 – 10 4 КОЕ/мл, при воспалительном процессе инфекционного происхождения – 10 5 и выше КОЕ/мл. О двух последних вариантах в разговорной речи, порой, выражаются просто: «Плохой бак посев».

Как «найти управу» на патогенный микроорганизм?

Одновременно с посевом материала в таких ситуациях производится посев микрофлоры на чувствительность к антибиотикам, который даст четкий ответ врачу – какие антибактериальные препараты и в каких дозах «испугают» «незваного гостя». Здесь тоже есть своя расшифровка, например:

• Вид микроорганизма, допустим, та же Е.coli в количестве 1х10^ 6 ;
• Название антибиотика с обозначением (S) указывает на чувствительность возбудителя к этому препарату;
• Вид антибиотиков, не действующих на микроорганизм, обозначается символом (R).

Бактериологический анализ представляет особую ценность в определении чувствительности к антибиотикам, поскольку основной проблемой в борьбе с хламидией, микоплазмой, уреаплазмой и др. остается подбор действенного лечения, не приносящего вред организму и не ударяющего по карману пациента.

Таблица: альтернативный пример результатов бак-посева с выявлением эффективных антибиотиков

Правильная подготовка к бактериологическому анализу – залог достоверного результата

Бактериологическому анализу может подвергаться любой биологический материал, взятый у человека (кожа, кровь, сперма, слизистые ротовой полости, дыхательных и мочеполовых путей, желудочно-кишечного тракта, органов зрения, слуха и обоняния и др.). Чаще всего бак посев назначают гинекологи и урологи, поэтому на нем следует несколько остановиться.

Правильная подготовка к бактериологическому посеву будет залогом правильного результата, потому что в противном случае, анализ придется сдавать заново и ждать назначенное время. Как сдать кровь на стерильность из вены – это задача медработников. От больного здесь, как правило, ничего не зависит, он просто предоставляет локтевой сгиб, а медсестра производит забор в стерильную пробирку с соблюдением всех правил асептики и антисептики.

Другое дело – моча или из половых путей. Здесь пациент должен обеспечить первый этап (забор), соблюдая предписанные правила. Следует заметить, что моча женщин и мужчин несколько отличается, хотя в мочевом пузыре у обоих полов она стерильна:

• У женщин при прохождении через мочеиспускательный канал может захватить небольшое количество непатогенных кокков, хотя в целом, часто остается стерильной;
• У мужчин все несколько по-другому. Передняя часть уретры может снабдить проходящую мочу находящимися там:
  1. дифтероидами;
  2. стафилококками;
  3. некоторыми непатогенными грамотрицательными бактериями, что и покажет впоследствии бактериологический анализ.

Однако, если они находятся в допустимой концентрации (до 10 3 КОЕ/мл), то пугаться нечего, это вариант нормы.

Чтобы избежать присутствия других микроорганизмов и максимально обеспечить стерильность взятого материала , перед сдачей анализа производится тщательный туалет половых органов (вход во влагалище у женщин закрывается ватным тампоном – защита от попадания отделяемого половых органов). Для анализа берется средняя порция мочи (начало мочеиспускания в унитаз, приблизительно 10 мл средней порции в стерильную баночку , окончание в унитаз). Пациентам необходимо знать: моча, взятая на посев, должна быть обработана не позднее, чем через два часа при хранении не выше 20°С, поэтому следует рассчитывать время на транспортировку.

Кроме этого материал на бак посев при необходимости берут из уретры и прямой кишки у мужчин, из уретры, прямой кишки, влагалища, шейки матки и цервикального канала – у женщин, но это происходит в медицинском учреждении, куда пациент должен прибыть. Подмывание, спринцевание и использование антисептических средств в таких случаях запрещено.

Другие вопросы, волнующие пациентов

Многие пациенты интересуются, сколько дней делается анализ. Однозначно на этот вопрос ответить нельзя, все зависит от того, какой материал подвергается исследованию и какой возбудитель нужно искать. Иногда ответ готов через 3 дня, иногда через неделю или даже дней 10 – 14 , поскольку некоторые образцы требуют пересева на другую среду.

Не обходят стороной люди, направляющиеся на бак посев и вопрос о цене анализа. Примерная стоимость в Москве составляет порядка 800 – 1500 рублей. Разумеется, она может быть выше и зависит от широты спектра бактериологического поиска. Бесплатно анализ, наверное, можно сдать при беременности в женской консультации, или в поликлинике по особым медицинским показаниям.

Для беременных бак посев является обязательным, сдается 2 раза (при постановке на учет и в 36 недель), при этом, мазок берется не только из половых путей, но и со слизистых носа и зева. Объектом поиска в данном случае, кроме урогенитальных инфекций, будет золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus), который в послеродовом периоде может натворить много бед (гнойный мастит и др). Кроме этого, беременным в обязательном порядке делается посев мочи, соскоба влагалищного эпителия и мазки из шейки матки и цервикального канала.

Многие женщины, перед тем как отправиться на процедуру очень боятся таких страшных слов и начинают раздумывать: «А нужно ли это? Может, не пойти». Спешим заверить, что анализы абсолютно безболезненны. Мазок из шейки матки и цервикального канала берется стерильной цитощеткой, не причиняя женщине абсолютно никакой боли, зато впоследствии бак посев из ш/м и ц/к защитит и будущую мать, и плод от возможных осложнений. Объектом поиска при беременности являются возбудители хламидиоза, уреа- и микоплазмы, дрожжеподобный (обычно это Candida albicans), и другие условно-патогенные и патогенные микроорганизмы.

Видео: ролик-демонстрация по бак-посеву из цервикального канала

Частные случаи, особо интересные сдающим анализы

Попав в половые пути патогенные микроорганизмы, через самое короткое время осваиваются и начинают свою вредную деятельность. Например, всегда патогенные гонококки (Neisseria), являющиеся виновниками довольно неприятной болезни, называемой и относящейся к ЗППП, чувствуют себя «как дома» буквально на 3 день. Они начинают активно размножаться и смело двигаться по половым путям вверх, захватывая все новые территории. Всем известно, что гонорея нынче неплохо лечится и ее уже почти никто не боится. Но для начала ее нужно найти. Основным методом поиска этой инфекции считается бак посев, культивирование, идентификация с помощью окрашивания по Граму, микроскопия.

Найденные в мазке, взятом «на флору» из половых путей, попарно лежащие «кофейные зерна» (диплококки), не указывают на наличие венерического заболевания. Такая микрофлора влагалища часто появляется в постменопаузе и ни о чем плохом не говорит. Отобранный в нестерильных условиях на предметное стекло и окрашенный метиленовым синим или по Романовскому (цитология) мазок, не может дифференцировать микроорганизм. Он может только предположить и направить пациентку на дополнительное исследование (получение изолированной культуры).

Следует заметить, что, если соскоб со слизистых мочеполовых путей, взятый для посева на уреаплазму, является не таким уж редким явлением, то посева мочи сами врачи часто избегают, поскольку с ней работать сложнее.

Трудности в диагностике создает , приносящая большой вред не только при беременности . Кроме этого, хламидия вызывает множество заболеваний, свойственных не только женщинам, но и мужскому населению тоже, поэтому ее сеют, культивируют, изучают, определяют чувствительность к антибактериальной терапии и, таким образом, борются с ней.

При беременности вообще без бактериологического посева трудно обойтись, поскольку многие микроорганизмы, маскируясь в цитологическом мазке, могут быть пропущены. Между тем, влияние некоторых возбудителей ЗППП на плод бывает губительным. К тому же лечить беременную женщину значительно сложнее, а назначать антибиотики «на глаз» просто недопустимо.

Методы посева

Для выделения чистых культур возбудителей на первом этапе прибегают к их посеву на соответствующие среды, который проводится в специальных (стерильных!) условиях. В основном, перенос материала на среду осуществляется с помощью приспособлений, применяемых еще в 19 века великим Луи Пастером:

• Бактериальной петлей;
• Пастеровской пипеткой;
• Стеклянной палочкой.

Конечно, многие инструменты за 2 столетия претерпели изменения, на смену пришли пластиковые стерильные и одноразовые, однако и старые не остались в прошлом, продолжая и поныне служить микробиологической науке.

Первый этап получения колоний требует соблюдения определенных правил:

1. Посев осуществляется над спиртовкой в боксе, предварительно обработанном дезинфектантами и кварцеванием, или в ламинарном шкафу, обеспечивающем стерильность в рабочей зоне;
2. Одежда медработника, перчатки и среда также должны быть стерильными, поскольку обратное мешает выделению изолированных штаммов;
3. Работать в боксе нужно быстро, но аккуратно, нельзя разговаривать и отвлекаться, при этом – необходимо помнить о личной безопасности, ведь материал может быть заразным.

Выделение штаммов и изучение чистых культур

Выделение штаммов не всегда одинаково, поскольку некоторые биологические среды, находящиеся в человеческом организме требуют индивидуального подхода, например, гемокультуру (кровь) сначала в жидкой среде (соотношение 1: 10) немного «подращивают», поскольку кровь (неразведенная) может убить микроорганизмы, а затем, через сутки или больше, пересевают на чашки Петри.

Посев мочи, промывных желудочных вод и других жидких материалов тоже имеет свои особенности, где для получения чистой культуры, жидкость сначала следует центрифугировать (условия – асептические!), а уж затем сеять, причем не саму жидкость, а ее осадок.

Культивирование и выращивание колоний осуществляют на чашках Петри или помещают сначала в жидкую среду, разлитую в стерильные флакончики, а затем изолированные колонии еще раз высевают, но уже на скошенный агар и помещают материал на сутки в термостат. Убедившись в чистоте полученной культуры, штаммы переносят на предметное стекло, делают мазок и окрашивают по Граму (чаще всего), Цилю-Нильсену и др. и для дифференцировки изучают морфологию микроба под микроскопом:

• Размер и форму бактериальной клетки;
• Наличие капсул, жгутиков, спор;
• Тинкториальные свойства (отношение микроорганизма к окрашиванию)*.

*Читатель, вероятно, слышал о таком возбудителе, как бледная трепонема? Это – возбудитель сифилиса, а ее название (бледная) поэтому и появилось, что она плохо воспринимает краски и остается слегка розоватой при окрашивании по Романовскому. Микроорганизмы, невоспринимающие анилиновые красители называются грамотрицательными, а воспринимающие – грамположительные. Грамотрицательным бактериям придают розовый или красный цвет при окраске по Граму дополнительные красители (фуксин, сафранин).

Бак посев можно назвать древним анализом, однако его популярность от этого отнюдь не падает, хотя современная бактериология имеет возможности выделения не только штаммов, но и отдельной клетки из него, которая называется клоном . Однако для получения клона необходим специальный прибор – микроманипулятор, который в обычных лабораториях отсутствует, поскольку применяется, в основном, в научно-исследовательских целях (генетические исследования).

В урологической практике инфекции мочевых путей являются наиболее часто встречающимися бактериальными заболеваниями, в лечении и диагностике которых имеются свои трудности, наиболее часто связанные с атипичным характером возбудителя и его устойчивостью к проводимой антибактериальной терапии.

Поэтому, согласно современным медицинским рекомендациям, для диагностики и мониторинга течения инфекций мочевыводящих путей у лиц повышенного риска обязательное проведение бакпосева мочи. В этом материале мы рассмотрим, что такое бакпосев мочи, что показывает этот анализ и как правильно к нему подготовиться.

Бактериологический посев (бакпосев или бактериологическое исследование мочи) на наличие патологической микрофлоры – высокоточный микробиологический анализ, позволяющий не только выделить и идентифицировать возбудителя мочевой инфекции, но и определить его точную концентрацию (степень бактериурии), а также степень чувствительности к важнейшим группам антибактериальных средств.

Исследование позволяет:

1. 1 Идентифицировать возбудителя инфекции;
2. 2 Определить его диагностический титр в 1 мл мочи;
3. 3 Выявить наличие антибиотикорезистентности (устойчивости или чувствительности к антибиотикам);
4. 4 Отслеживать снижение титра возбудителя в процессе терапии;
5. 5 Выбрать наиболее эффективные антибактериальные препараты лечения;
6. 6 Осуществлять мониторинг распространённости в популяции антибиотико-резистентных штаммов микроорганизмов.

• Показать всё

  1. Показания к бактериологическому исследованию мочи

  Основными целями анализа, которые преследует лечащий врач при назначении бакпосева мочи, являются диагностика и мониторинг бактериальных инфекций органов мочевого тракта, а также определение чувствительности патогена к антибиотикотерапии.

  Иногда бактериологическое исследование (бакпосев) мочи применяется в качестве скрининга для профилактики воспалительных заболеваний мочевого тракта у лиц повышенного риска (беременные, пожилые, больные сахарным диабетом). Основным показанием к назначению бакпосева мочи является наличие симптомов мочевой инфекции.

  Однако, согласно российским урологическим рекомендациям, при выявлении у пациента неосложненной мочевой инфекции, а также при отсутствии сопутствующих заболеваний, антибактериальная терапия может назначаться эмпирическим путем, без предварительного определения возбудителя. Эмпирическое назначение антибиотиков позволяет достичь положительного эффекта примерно в 75-80% случаев.

  Безусловными показаниями к проведению исследования мочи на микрофлору служат:

  1. 1 Инфекции мочевого тракта у беременных;
  2. 2 Подозрение на наличие у пациента пиелонефрита;
  3. 3 Все случаи инфицирования мочевых путей у мужчин;
  4. 4 Вспышки госпитальных урологических инфекций;
  5. 5 Лихорадка при длительной катетеризации мочевого пузыря, а также подозрение на урологическую инфекцию, связанную с проведением медицинской манипуляции (цистоскопии, катетеризации);
  6. 6 Лихорадка выше 38 С без видимых причин у детей в возрастной группе до 3-х лет;
  7. 7 Рецидивирующие мочевые инфекции, неэффективность проводимой ранее эмпирической антимикробной терапии;
  8. 8 Осложненные мочевые инфекции в возрасте старше 65 лет;
  9. 9 Появление симптомов урологической инфекции у лиц с нарушением иммунного статуса, хроническими болезнями почек, сахарным диабетом, врожденными аномалиями строения почек и мочеточников, после операции по трансплантации почки;
  10. 10 Прием больным в течение трех предшествующих месяцев антибактериальных препаратов, что теоретически могло привести к формированию резистентных форм возбудителей.
  1. 1 Женщины в период беременности, после 14 недели, даже в отсутствии каких-либо симптомов патологии, что позволяет снизить риск развития пиелонефрита беременных;
  2. 2 Больные с планируемым проведением хирургического вмешательства на органах мочевыделительной системы;
  3. 3 Пациенты с наличием почечного трансплантата в течение первых двух месяцев после проведения оперативного вмешательства, а далее при любом ухудшении работы трансплантированного органа.

  2. Правила сбора материала

  Как правильно сдавать бакпосев мочи при беременности, у взрослых и детей рассмотрим далее. Для обеспечения точности лабораторной диагностики урологической инфекции важно соблюдение всех этапов диагностики, в том числе и преаналитической ее части – сбора проб мочи и их доставки.

  Именно потребность в определении точного количества бактериальных агентов в исследуемом образце предъявляет особые требования к сбору образцов.

  При проведении исследования в условиях стационара, за подготовку пациента, сбор материала и транспортировку его в лабораторию отвечает средний медицинский персонал стационара. Для таких случаев в лабораториях имеются инструкции в письменной форме, регламентирующие все диагностические этапы.

  При обследовании в амбулаторных условиях, больной производит сбор мочи самостоятельно, без наблюдения медицинского работника. В связи с вышесказанным, необходимо тщательно инструктировать пациента по технике выполнения самостоятельного сбора исследуемого материала, во избежание ложного результата анализа.

  1. 1 Забор мочи необходимо производить в специально предназначенную для этого стерильную одноразовую емкость, которую можно приобрести в аптечной сети. Не допускается забор мочи в нестерильные, ранее бывшие в употреблении контейнеры, баночки или бутылки;
  2. 2 По возможности забор мочи должен производиться до начала приема антибактериальных препаратов или в интервалах между лекарственными курсами, для исключения искажения полученной информации;
  3. 3 Наиболее достоверно исследование средней утренней порции мочи – после ночного сна и до завтрака;
  4. 4 Вечером, накануне сбора мочи рекомендуется по возможности воздержаться от приема мочегонных средств, так как при их приеме происходит разбавление мочи и снижение общего числа бактерий в одном миллилитре;
  5. 5 Для забора мочи у грудничков следует пользоваться специальными детскими мочеприемниками с гипоаллергенным адгезивным средством, собранный образец в последствии переливается в емкость для сбора мочи, маркируется и транспортируется в лабораторию.

  

  Рисунок 1 - Стерильные контейнеры для сбора мочи на анализ (без лопаточки)

  3. Основные этапы самостоятельного забора мочи

  Описанная ниже процедура сбора мочи применяется у всех взрослых, в том числе и беременных женщин. Оптимальный объем мочи для проведения микробиологического анализа составляет примерно 10-20 мл, а минимальный не должен быть менее 1 мл.

  Этапы самостоятельного сбора исследуемого материала можно представить следующим образом:

  1. 1 Тщательно вымыть руки мыльной водой, насухо вытереть их чистым (желательно одноразовым) полотенцем;
  2. 2 Произвести туалет наружных половых органов с использованием теплой мыльной воды, без использования кожных антисептиков, просушить паховую область чистой одноразовой салфеткой;
  3. 3 Открыть заранее подготовленный стерильный контейнер, избегая дотрагиваться пальцами до его внутренних поверхностей;
  4. 4 Выпустить первую порцию мочи, остановить мочеиспускание;
  5. 5 Следующую (среднюю) порцию собрать в подготовленный стерильный контейнер, не касаясь емкостью кожных покровов в паховой области;
  6. 6 Завершить мочеиспускание в унитаз;
  7. 7 Плотно закрыть крышку заполненного контейнера, подписать, прикрепить к контейнеру направление на анализ тонкой резинкой, доставить его в лабораторию.

  Недопустимо использовать для микробиологического исследования мочу из подкладного судна и мочу у женщин в период менструаций.

  Как правильно собрать мочу на бакпосев у ребенка?

  1. 1 Дать ребенку выпить теплой воды или иной жидкости (грудничку можно дать грудь);
  2. 2 Помыть руки мыльной водой, высушить чистым полотенцем;
  3. 3 Произвести туалет наружных половых органов ребенка;
  4. 4 По возможности произвести забор средней порции мочи, усадив ребенка на колени помощника. При невозможности забора средней порции можно воспользоваться специально предназначенным детским мочеприемником, проверять который следует не реже, чем каждые 10 минут.
  5. 5 Нельзя использовать для анализа мочу из горшка.

  

  Рисунок 2 - Сбор мочи у грудного ребенка в стерильный мочеприемник

  4. Правила доставки материала в лабораторию

  Условия доставки образца мочи в лабораторию оказывают прямое влияние на точность проведенного бактериологического исследования, поскольку они могут как снижать жизнеспособность, так и стимулировать размножение бактерий в представленной порции мочи.

  Образец следует доставить в лабораторию не позднее, чем через два часа после забора. Оптимальный срок посева проб мочи составляет менее 30 минут после мочеиспускания, однако в связи с трудностью реализации приведенного условия, данный срок во многих лабораториях регламентируется до 1-2 часов.

  При невозможности осуществления доставки в указанный срок, разрешается хранение материала при температуре не выше +40С в течение суток с момента забора. Замораживать образец мочи запрещено – это приводит к гибели некоторых видов микроорганизмов.

  Для повышения качества исследования, а также для обеспечения более длительного хранения допускается использование специальных стабилизаторов, например, 1% борной кислоты. Однако, добавление таких консервантов допустимо лишь в строго разрешенном объеме.

  В связи с этим, при проведении бактериологического исследования мочи, целесообразно использование коммерческих транспортных систем (спец.пробирок), в которых при добавлении определенного количества мочи достигается определённая концентрация консерванта.

  При наличии специальных тест-систем возможно проведение экспресс-бакпосева, не отходя от постели больного (тест-полоски «Диаслайд», «Дипстрик»), однако в России это мало распространено в связи с дороговизной оборудования.

  Все поступившие в лабораторию образцы мочи обязательно маркируются лаборантом любым доступным способом, позволяющим точно идентифицировать одну пробу от другой.

  Не принимаются на исследование:

  1. 1 Пробы мочи без маркировки и направления;
  2. 2 Пробы без указания даты, времени и метода сбора;
  3. 3 Подвергшиеся хранению более 24 часов от момента доставки;
  4. 4 При нарушенной целостности контейнера для сбора;
  5. 5 Пролитые и открытые образцы.

  5. Техника выполнения

  Российские лаборатории выполняют исследование мочи на микрофлору согласно приказу МЗ №535 от 22.04.1985 года "ОБ УНИФИКАЦИИ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИХ (БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКИХ) МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ, ПРИМЕНЯЕМЫХ В КЛИНИКО-ДИАГНОСТИЧЕСКИХ ЛАБОРАТОРИЯХ ЛЕЧЕБНО-ПРОФИЛАКТИЧЕСКИХ УЧРЕЖДЕНИЙ"

  За последние несколько лет приказ неоднократно дополнялся и обновлялся.

  В проведении бактериологического посева участвуют врач-бактериолог и лаборант (фельдшер-лаборант). В обязанности врача входит контроль технологии проведения исследования и непосредственное выполнение всех необходимых этапов диагностики.

  Лаборант же отвечает за прием поступивших проб мочи, оформление сопроводительных документов к ним, приготовление необходимых диагностических сред и реагентов, культивирование посева, количественный подсчет выращенных бактериальных колоний, уничтожение расходных материалов и остатков проб.

  Для проведения посева используется несколько типов питательных сред:

  1. 1 Универсальные (кровяной агар, CLED) – поддерживающие рост как грамположительных, так и грамотрицательных микроорганизмов;
  2. 2 Дифференциально-диагностические (хромогенные) – используемые для дифференцировки уропатогенов, меняющие цвет при контакте с продуктами их жизнедеятельности;
  3. 3 Селективные (колумбийский агар, агар Эндо, МакКонки) – позволяют отдельно выращивать грамположительные и грамотрицательные возбудители.

  Приобретение питательных сред для культивирования возбудителей происходит в готовом виде или в виде специализированных сухих смесей для самостоятельного приготовления. Для сухих смесей обязательно прилагается инструкция, точно регламентирующая все этапы приготовления.

  Для получения результата бакпосева мочи не секторным методом в чашку Петри, заполненную неселективной средой наносится определенный объем исследуемого материала (в данном случае ровно 1 мкл мочи). Затем в исследуемый образец погружается специальная микробиологическая петля, татированная на соответствующий объем.

  Материал распределяется по поверхности в центральной области в виде нескольких прямых линий, а затем горизонтальными штрихами, перпендикулярными им.

  

  Рисунок 3 - Бакпосев мочи, нанесение материала на питательную среду в чашке Петри

  При использовании метода секторных посевов, чашку Петри заранее делят на 4 равных сектора, обозначенными буквами алфавита. Стерильной петлей выполняется посев мочи в количестве 0,005 мл, поочерёдно в четырех секторах. При переходе в последующий сектор петлю предварительно прожигают.

  Посев мочи на неселективные среды позволяет произвести количественный посев, тогда как селективные среды используются для получения изолированных колоний и первичного определения микроорганизма, поэтому моча наносится на них не мерно.

  Чашки Петри находятся в термостате при температуре 35-37 в течение 18-24 часов, после чего производится подсчет результата. В некоторых случаях (слабый рост флоры, несоответствие результата клинической картине, подозрение на наличие грибов и т.д.) инкубация может быть продлена до 2-х суток.

  При обнаружении роста бактерий с помощью специальных таблиц производится учет всех типов выросших колоний, а также оценивается их возможная патогенность.

  При обнаружении вероятных уропатогенов производится их дальнейшая идентификация с помощью исследования культуральных, биохимических, тинкториальных и агглютинативных свойств, а также определяется степень их чувствительности к антимикробным препаратам.

  6. Определение антибактериальной чувствительности

  Определение чувствительности уропатогенам к антибиотикам производится одним из трех методов, рекомендованных европейским комитетом по антибиотикорезистентности:

  1. 1 Дисковым методом – на поверхность агара в чашке Петри наносят взвесь бактерий заранее известной плотности, затем помещают сверху диски, содержащие определенную концентрацию антибиотика, что приводит к появлению зоны подавления роста бактерий, по диаметру которой судят о чувствительности микроорганизма и определяют минимальную подавляющую концентрацию препарата;
  2. 2 Градиентно-диффузным Е-тестом – метод схож с дисковым, однако вместо антибактериальных дисков используются полоски с Е-тестом, содержащие концентрационный градиент антибиотика от минимума к максимуму. В данном случае также определяется минимальная подавляющая концентрация препарата;
  3. 3 Методом серийных разведений – антибиотик разводится в нескольких, заранее известных концентрациях, после чего вводится в агар для культивирования бактерий. По степени подавления бактериального роста также можно судить о наличии или отсутствии чувствительности к антибиотику.

  7. Интерпретация результатов

  При расшифровке результата бакпосева мочи обязательно учитывается выраженность клинических проявлений урологической инфекции, соблюдение методики забора материала, правил транспортировки и хранении образцов.

  Все виды урологических инфекций можно поделить на моно- и смешанные, протекающие с выделением до двух видов возбудителей.

  При обнаружении в исследуемом материале трех и более патогенов ситуацию рассматривают как признак случайной контаминации (загрязнения) пробы мочи. В этом случае исследование рекомендовано повторить с соблюдением всех этапов забора и диагностики.

  В настоящее время все бактерии, обнаруживаемые в мочевых путях принято делить на три группы, что влияет на их минимально значимый диагностический титр (при посеве 1 мкл):

  • Первичные патогены (кишечная палочка, сальмонеллы, микобактерии, лептоспиры). Эти микроорганизмы являются облигатными патогенами, их минимально значимый диагностический титр более 10х3 КОЕ/мл;
  • Вторичные патогены (энтеробактерии, клебсиеллы, синегнойная палочка, золотистый стафилококк, гемофильная палочка).

  Данные возбудители патогенны лишь в определенных условиях – при ослаблении иммунитета, после инвазивных лечебных процедур, при сопутствующих хронических состояниях более, их минимальный диагностический титр 10х4 КОЕ/мл;

  • Сомнительные патогены (коагулазонегативные стафилококки, стрептококк агалактия, ацинетобактер, Pseudomonas spp, их минимальная диагностическая концентрация более 10х5 КОЕ/мл.

  Выделение представителей нормальной микрофлоры, таких как дифтероиды, гарднереллы, альфа-гемолитические стрептококки не является диагностически значимым.

  8. Причины ложных результатов

  Одной из самых значимых причин появления ложных результатов бактериологического анализа мочи является несоблюдение стандартизированной технологии проведения исследования, в частности:

  1. 1 Увеличение посевной дозы исследуемого материала;
  2. 2 Несоблюдение продолжительности преаналитического периода хранения мочи;
  3. 3 Нарушение норм сбора мочи;
  4. 4 Отсутствие гигиены наружных половых органов перед сбором мочи;
  5. 5 Сбор мочи в неподходящие емкости;
  6. 6 Нарушение температурного режима хранения и транспортировки;
  7. 7 Проведение исследования в период антибиотикотерапии или в период менструаций у женщин;
  8. 8 Несоблюдение времени выдержки материала в термостате.

Бак посев мочи широко применяется во врачебной практике, поскольку является простым и высокоинформативным методом диагностики многих заболеваний, особенно патологий почек и мочевыводящих путей. Чтобы получить достоверные результаты, следует знать, чем этот вид исследований отличается от общего анализа мочи и как нужно собирать и хранить материал для анализов.

Что такое бактериологический посев

Считается, что моча здорового человека стерильна, в то время как при воспалительных заболеваниях почек и мочевого пузыря в урине появляются патогенные бактерии. Она заражается, если проходит по мочевыводящим путям, пораженным болезнетворными микроорганизмами. Бактериальный посев мочи (иначе его называют анализом на флору или на стерильность) позволяет выявить их наличие, вид и количество.

В моче могут обитать стафилококки, стрептококки, кишечные палочки, дифтероиды, лактобактерии. При их избыточном содержании, они представляют опасность для здоровья и провоцируют развитие инфекции мочеполовой системы.

Зачем сдают бак посев мочи

Сдать анализ урины на патогенную флору необходимо:

• в ходе диагностики при подозрении на инфекционное поражение почек, мочевого пузыря, мочевыводящих путей;
• при рецидиве хронической инфекции;
• в период беременности;
• при сахарном диабете;
• при выборе антибактериальных препаратов;
• для контроля лечебного процесса.

Как подготовиться к исследованию

Мочу нельзя собирать одновременно для общего анализа и на бактериальный посев.

Перед забором жидкости необходимо провести тщательную гигиеническую обработку половых органов, иначе врач получит искаженные результаты исследования и может назначить неправильное лечение. Женщинам микробиологическое исследование мочи нельзя проводить в период менструации.

За 2-3 дня до сбора урины не следует:

• принимать лекарства, особенно диуретики (исключение - жизненно важные препараты);
• заниматься сексом;
• допускать сильное физическое переутомление.

Готовясь к сдаче анализов на бак посев, нужно исключить из рациона продукты, которые изменяют цвет и консистенцию мочи и могут сказаться на достоверности результатов анализа. Это:

• свекла;
• морковь;
• все цитрусовые;
• острые приправы;
• любые жирные продукты и блюда, копчености.

В аптеке необходимо приобрести стерильную емкость для мочи. Недопустимо брать на микробиологический посев урину из медицинского судна. В обязательном порядке применяется мыло, лучше хозяйственное, и чистое полотенце. Его необходимо прогладить с обеих сторон и сложить вчетверо. Подготовка к гигиенической процедуре начинается с тщательного мытья рук.

Бак анализ мочи/ бакпосев/ бактериологическое исследование. Как сдавать? Сколько делается анализ?

Общий анализ мочи. Для чего нужен бак посев и как правильно собирать мочу.

15 Бак посев мочи

Затем необходимо вымыть теплой кипяченой водой наружные половые органы, совершая движения к заднему проходу, и обсушить их внутренней стороной развернутого полотенца. Женщине нужно ввести во влагалище стерильный тампон, чтобы не допустить проникновения бактерий из половых органов в мочу. После этого можно приступить к сбору.

Как собрать мочу на бакпосев

Правильным будет сдать на микробиологический посев утреннюю мочу. Забор жидкости вечером и ее хранение в холодильнике до утра недопустимы. Собирать материал сначала в пробирку или другую емкость и переливать ее в стерильный контейнер также запрещено. Для сдачи на анализ необходимо 50-70 мл мочи (в некоторых лабораториях достаточно и 10 мл).

1. Открыть контейнер для мочи. При этом нельзя прикасаться к внутренним поверхностям емкости и крышки.
2. Помочиться, сливая первую порцию урины в унитаз, и задержать акт мочеиспускания.
3. Подставить контейнер и, не прикасаясь к нему половыми органами, наполнить емкость срединной порцией мочи.
4. Окончательно помочиться в унитаз.
5. Закрыть контейнер крышкой, написать свою фамилию и прикрепить направление на посев флоры резинкой.
6. Доставить образец в баклабораторию не позже чем через 2 часа.

Сдача анализа при беременности

В первую очередь необходимо выявить микроорганизмы, которые опасны во время беременности. В их числе:

• золотистые стафилококки;
• трихомонады;
• стрептококки;
• дрожжеподобные грибки.

Согласно медицинским стандартам, беременным женщинам необходимо проводить посев урины на стерильность дважды: при постановке на учет и перед родами. Это обязательная диагностическая процедура.

Сбор мочи у ребенка

Не разрешается брать для анализа материал из детского горшка. Собирать его нужно только в стерильный контейнер, предварительно вымыв руки с мылом.

Трудности возникают с малышами. Для облегчения сбора мочи на бактериальный посев рекомендуется:

• За 20-30 минут до начала манипуляций предложить ребенку выпить теплой воды или чая. Младенцу дать грудь.
• Тщательно вымыть половые органы ребенка.
• Усадить малыша на колени помощника и наполнить контейнер срединной порцией урины. При сборе жидкости на посев у грудничка следует использовать аптечный детский мочеприемник. Его наполнение нужно проверять через каждые 8-10 минут.

Проведение исследования

Бак посев мочи выполняет бактериолог и лаборант. Жидкость добавляют в различные питательные среды на основе желеобразного агара. Затем материал помещают в термостат, где его выдерживают от 18 часов до 2 суток при комфортной для микроорганизмов температуре +35…+37°С. Наличие болезнетворных бактерий определяют с помощью микроскопа. Количественный подсчет колоний всех типов производят с использованием специальных таблиц. Выявляется потенциал бактерий вызывать патологию. Посев мочи на флору занимает примерно от 10 до 14 дней.

Расшифровка результатов

Лаборатория выдает 2 бланка: первый - информация о видах обнаруженных бактерий в КОЕ (колониеобразующих единицах), второй - антибактограмма (исследование на эффективность антибиотиков против каждого вида болезнетворных микроорганизмов). У КОЭ есть нижние и верхние пределы. Их превышение свидетельствует о наличии воспалительного процесса в организме. Чем больше показатель КОЕ, тем выше концентрация патогенных бактерий в 1 мл биологической жидкости.

Расшифровка результатов посева на стерильность:

• меньше 103 (1 000) - норма, лечение не требуется;
• от 103 (1 000) до 104 (10 000) - в моче присутствует условно-патогенная флора;
• больше 105 (100 000) - в мочеполовой системе имеется очаг инфекции.

Если в расшифровке посева оказываются промежуточные (размытые) границы - от 1 000 до 10 000 КОЕ/мл, то оценка считается сомнительной, и исследование проводится повторно.

Микробиологический посев ценен высокой диагностической эффективностью, но интерпретацию его результатов необходимо соотносить с клиническими проявлениями диагностируемой патологии.